刘伯勋在演艺生涯中从文工团起步，参与了多项话剧演出。早在参军期间，他就加入沈阳军区政治部文工团，出演了话剧《绿荫下的红塑料桶》，这部作品聚焦军营生活细节，他负责其中一个配角的任务。接着，他又参演了《大漠可以作证》，这部话剧涉及边疆环境下的情节，他在剧中处理了多项舞台调度。文工团时期，他还参加了小品表演，其中《理发》是其代表作之一，这部小品以军人形象为基础，他通过道具使用如挂理发箱和挥动毛巾完成了表演环节。
2006年，刘伯勋转入影视领域，首次出演电视剧《小巷总理》，这部剧由导演刘建华执导，他从文工团被邀请参与，饰演了一个社区角色，涉及日常事务处理的情节。之后，他接演了《抗日冲锋队之雪域追踪》，这部剧集在高原场景拍摄，他负责了追踪敌人的行动序列。同期，他还出演了《陆军特战队》，这部作品强调军事训练，他参与了多项特战模拟的部分。
进入2010年代，刘伯勋专注于农村题材电视剧。2011年，他出演了《女人进城》，这部剧讲述了农村女性进城的故事，他饰演了一个支持角色的功能，涉及家庭冲突的化解。2012年，他参演了《女人的村庄》，这部剧由王茜华主演，他饰演王小得一角，处理了村庄内部的矛盾调解环节，与王茜华有多次对手戏。这部剧的拍摄过程中，他与王茜华建立了合作关系，后续多次共同出演。
展开剩余74%2013年，刘伯勋继续出演《女人当官》，这部剧延续了农村主题，他饰演王水一角，涉及官场决策的情节，与王茜华再次合作，完成了多项村务讨论的场景。2014年，他参演了《月是故乡明》，这部剧聚焦家乡情感，他负责了返乡角色的行动线。2015年，他首次出演电影《小镇来了王警官》，这部影片讲述了基层警务工作，他饰演了一个小镇居民，参与了调查事件的环节。同年，他还出演了《岁岁年年柿柿红》，这部剧涉及家庭传承，他处理了多项农事活动的部分。
2016年，刘伯勋参演了《赵氏孤儿》，这部剧改编自经典故事，他饰演了一个辅助角色，完成了营救序列的表演。同期，他保持了小品演出，如在节假日登台，延续了《理发》的风格。2017年，他继续农村剧的拍摄，参与了多项类似题材的作品，保持了稳定的输出节奏。2018年，他出演了更多配角角色，涉及社会议题的电视剧，完成了多项对话密集的戏份。
2019年，刘伯勋的演艺活动持续，他参演了多项电视剧，重点在现实主义风格上发力。2020年，尽管疫情影响拍摄进度，他仍完成了几部作品的录制，调整了多项档期。2021年，他参演了新剧集，保持了与王茜华的合作频率。这一年，他还处理了家庭事务，生下了第二个孩子，即小女儿。
2022年上半年，刘伯勋继续演艺工作，参与了多项剧组的拍摄。6月，他在社交媒体发布了最后一条动态，分享了小女儿的生活片段，这条动态涉及日常照顾的内容。7月1日凌晨，他突发心肌梗塞，当时他正处于家中，症状出现后被紧急送往医院，医生进行了抢救，但抢救无效，当天离世。这次事件发生在发病当天，医院确认了心梗为死因。
刘伯勋的经纪公司北京华映万像文化传媒于7月1日发布了讣告，确认了离世事实，并描述了他生前的性格特征，如热情仗义和敦亲睦友。公司在讣告中列出了他的多项作品，包括话剧和电视剧。高秀敏的女儿李萱在7月1日率先发布了消息，她在社交平台透露了离世信息，并表达了哀悼。
7月2日，好友刘天佐在社交媒体发文，确认了死因是心梗抢救无效，他提到两人曾是战友关系，共同经历过文工团时期。刘天佐的发文包括了多项回忆，如共同参演的经历。同期，王茜华也发布了悼念文字，她提到两人最近还在剧组合作，共同拍摄了农村题材作品。王茜华的发文强调了合作的默契，并列出了多项共同作品，如《女人的村庄》和《女人当官》。
7月3日，刘伯勋的告别仪式举行，亲友出席了现场。公司和好友在仪式后继续处理后事。妻子丁怡菲在朋友圈发布了消息，确认了离世细节，并提到需要独自照顾一对儿女。大儿子当时约6岁，小女儿8个月大。丁怡菲在后续处理中，将大儿子送至公婆处照顾，小女儿交由父母协助，她自己则寻找工作维持生计。
离世后，他的作品继续在电视台重播，如《女人当官》在多项平台上线，观众通过重播回顾了他的表演。《女人的村庄》也在2022年下半年进行了重映，涉及多项农村情节的讨论。他的多项小品视频在网络流传，如《理发》的片段被多次分享。
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